膠體金檢測法是一種定性檢測方法,其中涉及了抗原抗體的特異性反應(yīng),即某種抗體專一性的識別結(jié)合某種抗原。
但抗原抗體的結(jié)合人的肉眼并不可見,因此將抗體與膠體金進行偶聯(lián)。膠體金是金鹽被還原成金單質(zhì)后形成的金顆粒懸浮液,通常為紅色,并且在堿性條件下表面帶負(fù)電,因此可以與帶正電的物質(zhì)結(jié)合(如新冠病毒抗體),這兩個特性使肉眼無法看見的新冠抗體可以通過膠體金的顏色進行呈現(xiàn)。
新冠病毒抗原檢測板上面分為四個部分。第一部分是樣品孔,第二部分是膠體金納米顆粒與新冠病毒抗體①的偶聯(lián)物,第三部分是固定有新冠病毒抗體②的條帶(標(biāo)記為T,即Test,檢測線),第四部分固定的是能特異性結(jié)合新冠病毒抗體的另一種抗體(標(biāo)記為C,即Control,質(zhì)控線)。
T線顯色的原理:
加樣后,樣品向前流動,抵達(dá)第二部分時,若樣品中含有新冠抗原,膠體金偶聯(lián)的新冠病毒抗體①會識別并結(jié)合新冠抗原,樣品繼續(xù)向前流動,到達(dá)T線時,T線的新冠病毒抗體②也會結(jié)合新冠抗原。
即形成“T線抗體②—待測抗原—膠體金偶聯(lián)抗體①”的三元復(fù)合物,大量的膠體金在此處固定,顯示出紅色條帶,判斷為陽性。如果樣品中沒有新冠抗原時,T線的新冠抗體是無法抓住膠體金偶聯(lián)抗體的,T線不顯色,并判斷為陰性。
C線顯色的原理:
樣品向前流動帶動膠體金顆粒向前移動,過量的膠體金顆粒到達(dá)C線后,其偶聯(lián)的新冠病毒抗體①與C線的抗體結(jié)合,大量積聚后顯色紅色。若C線出無紅色條帶,說明抗原檢測板質(zhì)量出現(xiàn)問題,檢測結(jié)果不可信。
病毒就像一顆包裹著橡皮糖夾心的什錦軟糖。
“橡皮糖夾心”位于病毒體的中心,主要成分為核酸(ssRNA),為病毒的復(fù)制、遺傳和變異提供遺傳信息。
外層的“軟糖”是病毒體的蛋白質(zhì)外殼,稱“核衣殼”(N),可保護病毒核酸免受外界因素的破壞,并能介導(dǎo)病毒進入宿主細(xì)胞。
而入口之前,“軟糖”外包裹的一層“糖衣”便可以理解為病毒體的包膜,它是包繞在病毒核衣殼外面的雙層膜。
新型冠狀病毒的這層“糖衣”異常絢麗,其膜上有刺突糖蛋白(S)、包膜蛋白(E)和膜蛋白(M)。
在這些結(jié)構(gòu)蛋白中,N蛋白在不同SARS-CoV-2病毒株系中高度保守,且具有良好的免疫原性,為病毒侵染細(xì)胞后表達(dá)量最高的結(jié)構(gòu)蛋白,是良好的檢測生物標(biāo)志物。
目前,新型冠狀病毒抗原檢測一般以檢測N蛋白為主。
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